NF EN ISO 11063

NF EN ISO 11063

mai 2013
Norme Annulée

Qualité du sol - Méthode pour extraire directement l'ADN d'échantillons de sol

La présente Norme internationale spécifie une méthode pour extraire directement l'ADN d'échantillons de sol en vue d'analyser la structure globale et l'abondance des communautés microbiennes du sol en utilisant des techniques de PCR. Cette méthode est principalement destinée aux sols agricoles et forestiers. Cette méthode peut ne pas être appropriée aux sols riches en matières organiques (par exemple sols de tourbières) ou aux sols très pollués par des polluants organiques ou des métaux lourds. L'extraction directe de l'ADN d'échantillons de sol fournit des informations précieuses sur l'abondance et la structure des communautés microbiennes qui sont des paramètres clés pour estimer la biodiversité des communautés microbiennes telluriques. Les approches moléculaires utilisant l'amplification PCR (amplification en chaîne par polymérisation) de l'ADN extrait du sol offrent des perspectives prometteuses et peuvent contribuer, dans un futur proche, au développement d'outils de routine permettant de surveiller la qualité de la composante microbienne des sols. L'utilisateur de la méthode doit savoir que, même si le sol soumis au mode opératoire d'extraction de l'ADN est soigneusement tamisé (mailles de 2 mm, mode opératoire décrit en 5.1), des résidus végétaux peuvent demeurer dans les échantillons de sol et de ce fait, l'extrait d'ADN prélevé du sol peut être contaminé par des traces d'ADN végétal.

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Informations générales

Collections

Normes nationales et documents normatifs nationaux

Date de publication

mai 2013

Nombre de pages

34 p.

Référence

NF EN ISO 11063

Codes ICS

13.080.30   Propriétés biologiques des sols

Indice de classement

X31-263

Numéro de tirage

1 - 12/04/2013

Parenté internationale

ISO 11063:2012

Parenté européenne

EN ISO 11063:2013
Résumé
Qualité du sol - Méthode pour extraire directement l'ADN d'échantillons de sol

La présente Norme internationale spécifie une méthode pour extraire directement l'ADN d'échantillons de

sol en vue d'analyser la structure globale et l'abondance des communautés microbiennes du sol en utilisant

des techniques de PCR. Cette méthode est principalement destinée aux sols agricoles et forestiers. Cette

méthode peut ne pas être appropriée aux sols riches en matières organiques (par exemple sols de tourbières)

ou aux sols très pollués par des polluants organiques ou des métaux lourds.

L'extraction directe de l'ADN d'échantillons de sol fournit des informations précieuses sur l'abondance et

la structure des communautés microbiennes qui sont des paramètres clés pour estimer la biodiversité des

communautés microbiennes telluriques. Les approches moléculaires utilisant l'amplification PCR (amplification

en chaîne par polymérisation) de l'ADN extrait du sol offrent des perspectives prometteuses et peuvent

contribuer, dans un futur proche, au développement d'outils de routine permettant de surveiller la qualité de la

composante microbienne des sols.

L'utilisateur de la méthode doit savoir que, même si le sol soumis au mode opératoire d'extraction de l'ADN

est soigneusement tamisé (mailles de 2 mm, mode opératoire décrit en 5.1), des résidus végétaux peuvent

demeurer dans les échantillons de sol et de ce fait, l'extrait d'ADN prélevé du sol peut être contaminé par des

traces d'ADN végétal.

Normes remplacées (1)
NF ISO 11063
avril 2012
Norme Annulée
Qualité du sol - Méthode pour extraire directement l'ADN d'échantillons de sol

<p>La présente Norme internationale spécifie une méthode pour extraire directement l'ADN d'échantillons de</p> <p>sol en vue d'analyser la structure globale et l'abondance des communautés microbiennes du sol en utilisant</p> <p>des techniques de PCR. Cette méthode est principalement destinée aux sols agricoles et forestiers. Cette</p> <p>méthode peut ne pas être appropriée aux sols riches en matières organiques (par exemple sols de tourbières)</p> <p>ou aux sols très pollués par des polluants organiques ou des métaux lourds.</p> <p>L'extraction directe de l'ADN d'échantillons de sol fournit des informations précieuses sur l'abondance et</p> <p>la structure des communautés microbiennes qui sont des paramètres clés pour estimer la biodiversité des</p> <p>communautés microbiennes telluriques. Les approches moléculaires utilisant l'amplification PCR (amplification</p> <p>en chaîne par polymérisation) de l'ADN extrait du sol offrent des perspectives prometteuses et peuvent</p> <p>contribuer, dans un futur proche, au développement d'outils de routine permettant de surveiller la qualité de la</p> <p>composante microbienne des sols.</p> <p>L'utilisateur de la méthode doit savoir que, même si le sol soumis au mode opératoire d'extraction de l'ADN</p> <p>est soigneusement tamisé (mailles de 2 mm, mode opératoire décrit en 5.1), des résidus végétaux peuvent</p> <p>demeurer dans les échantillons de sol et de ce fait, l'extrait d'ADN prélevé du sol peut être contaminé par des</p> <p>traces d'ADN végétal.</p>

Norme remplacée par (1)
NF EN ISO 11063
octobre 2020
Norme En vigueur
Qualité du sol - Extraction directe de l'ADN du sol

<p>Le présent document spécifie une méthode pour l'extraction directe de l'ADN des échantillons de sol afin d'analyser l'abondance et la composition des communautés microbiennes au moyen de différentes techniques de biologie moléculaire, y compris la PCR quantitative en temps réel (qPCR). Cette méthode est principalement destinée aux sols agricoles et forestiers. Cette méthode peut ne pas être appropriée aux sols riches en matières organiques (par exemple sols de tourbières) ou aux sols très pollués par des polluants organiques ou des métaux lourds.</p> <p>L'extraction directe de l'ADN des échantillons de sol fournit des informations précieuses sur la diversité α et β des communautés microbiennes. Le séquençage de dernière génération des amplicons obtenus par amplification PCR (amplification en chaîne par polymérase) de l'ADN extrait du sol offre des perspectives prometteuses et pourra contribuer, dans un avenir proche, au développement d'outils de routine permettant de surveiller les communautés microbiennes des sols.</p>

Sommaire
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  • Avant-propos
    iv
  • Introduction
    v
  • 1 Domaine d'application
    1
  • 2 Références normatives
    1
  • 3 Termes et définitions
    1
  • 4 Principe
    1
  • 5 Matériel d'essai
    2
  • 5.1 Sol
    2
  • 5.2 Substances chimiques
    2
  • 5.3 Tampons et réactifs
    3
  • 6 Appareillage
    4
  • 7 Modes opératoires
    4
  • 7.1 Préparation des échantillons de sol
    4
  • 7.2 Lyse mécano-chimique
    4
  • 7.3 Précipitation des protéines
    4
  • 7.4 Précipitation et rinçage des acides nucléiques
    4
  • 7.5 Conservation des acides nucléiques
    4
  • 8 Estimation de la qualité et de la quantité d'ADN du sol
    5
  • 8.1 Qualité et pureté de l'ADN du sol
    5
  • 8.2 Quantité d'ADN du sol
    5
  • 9 Validation du mode opératoire d'extraction
    5
  • 10 Étude interlaboratoires internationale
    5
  • 11 Rapport d'essai
    5
  • Annexe A (informative) Étude interlaboratoires internationale pour évaluer le mode opératoire d'extraction de l'ADN du sol
    7
  • Bibliographie
    22
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