NF EN ISO 15216-2
Microbiologie dans la chaine alimentaire - Méthode horizontale pour la recherche des virus de l'hépatite A et norovirus par la technique RT-PCR en temps réel - Partie 2 : méthode de détection
Le présent document spécifie une méthode de détection du virus de l'hépatite A (VHA) et des norovirus des génogroupes I (GI) et II (GII) dans des échantillons pour essai d'aliments (baies, légumes feuilles, tiges et bulbes, eau embouteillée, mollusques bivalves) ou sur des surfaces par RT-PCR en temps réel. Cette méthode n'est pas validée pour la détection des virus cibles dans d'autres aliments (y compris les aliments à plusieurs composants) ou d'autres matrices, ni pour la détection d'autres virus dans les aliments, sur les surfaces ou dans d'autres matrices.
Le présent document spécifie une méthode de détection du virus de l'hépatite A (VHA) et des norovirus des génogroupes I (GI) et II (GII) dans des échantillons pour essai d'aliments (baies, légumes feuilles, tiges et bulbes, eau embouteillée, mollusques bivalves) ou sur des surfaces par RT-PCR en temps réel.
Cette méthode n'est pas validée pour la détection des virus cibles dans d'autres aliments (y compris les aliments à plusieurs composants) ou d'autres matrices, ni pour la détection d'autres virus dans les aliments, sur les surfaces ou dans d'autres matrices.
<p>L'ISO/TS 15216-2:2013 décrit une méthode de détection qualitative des VHA et NoV des génogroupes I (GI) et II (GII) présents dans des échantillons pour essai d'aliments ou sur des surfaces alimentaires. Après libération des virus contenus dans l'échantillon pour essai, l'ARN viral est extrait par lyse à l'aide de thiocyanate de guanidine et par adsorption sur silice. Les séquences cibles de l'ARN viral sont amplifiées et détectées par la technique RT-PCR en temps réel. </p> <p>Cette approche est aussi applicable pour la détection desdits virus sur des matières contaminées, ou d'autres virus humains dans les aliments, sur les surfaces alimentaires ou sur les matières contaminées en suivant une validation appropriée et en utilisant des jeux d'amorces et de sondes propres à la cible.</p>
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1 Domaine d'application
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2 Références normatives
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3 Termes et définitions
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4 Principe
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5 Réactifs
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6 Équipement et consommables
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7 Échantillonnage
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8 Mode opératoire
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9 Interprétation des résultats
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10 Expression des résultats
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11 Caractéristiques de performance de la méthode
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12 Rapport d'essai
- Annexe A Diagramme de mode opératoire
- Annexe B Composition et préparation des réactifs et des tampons
- Annexe C Mélanges réactionnels de RT-PCR en temps réel et paramètres de cycles
- Annexe D Amorces et sondes d'hydrolyse de la RT-PCR en temps réel pour la détection du VHA, du norovirus GI et GII et du mengovirus (témoin de processus)
- Annexe E Multiplication de la souche du mengovirus MC0 utilisé comme témoin de processus
- Annexe F Extraction d'ARN avec le système NucliSens 3 3 BioMerieux NucliSens est l'appellation commerciale d'un produit fourni par BioMerieux. Cette information est donnée à l'intention des utilisateurs du présent document et ne signifie nullement que l'ISO approuve ou recommande l'emploi exclusif du produit ainsi désigné. Des produits équivalents peuvent être utilisés s'il est démontré qu'ils conduisent aux mêmes résultats. de chez BioMérieux
- Annexe G Solutions mères d'ARN contrôle externe (ARN CE)
- Annexe H Disposition de plaque optique type
- Annexe I Études de validation de la méthode et caractéristiques de performances
- Bibliographie
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