XP CEN ISO/TS 17919
Microbiologie de la chaîne alimentaire - Réaction de polymérisation en chaîne (PCR) pour la détection de micro-organismes pathogènes dans les aliments - Détection des clostridies productrices de neurotoxine botulique de type A, B, E et F
L'ISO/TS 17919:2013 spécifie une méthode horizontale de détection moléculaire des clostridies portant les gènes A, B, E et F de neurotoxine botulique par réaction de polymérisation en chaîne (PCR). Cette méthode détecte les gènes, et non les toxines. Par conséquent, un résultat positif n'est pas nécessairement synonyme de présence de ces toxines dans l'échantillon examiné. L'ISO/TS 17919:2013 s'applique aux produits destinés à être consommés par l'Homme, aux aliments pour animaux et aux échantillons environnementaux. Les réactions de PCR de détection des séquences génétiques codant ces types particuliers de toxine sont décrites.
L'ISO/TS 17919:2013 spécifie une méthode horizontale de détection moléculaire des clostridies portant les gènes A, B, E et F de neurotoxine botulique par réaction de polymérisation en chaîne (PCR). Cette méthode détecte les gènes, et non les toxines. Par conséquent, un résultat positif n'est pas nécessairement synonyme de présence de ces toxines dans l'échantillon examiné. L'ISO/TS 17919:2013 s'applique aux produits destinés à être consommés par l'Homme, aux aliments pour animaux et aux échantillons environnementaux.
Les réactions de PCR de détection des séquences génétiques codant ces types particuliers de toxine sont décrites.
- Avant-proposiv
- Introductionv
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1 Domaine dapplication1
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2 Références normatives1
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3 Termes et définitions1
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4 Symboles et termes abrégés2
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4.1 Symboles2
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4.2 Termes abrégés2
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5 Principes2
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5.1 Généralités2
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5.2 Enrichissement microbien2
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5.3 Extraction des acides nucléiques2
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5.4 Amplification par PCR2
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5.5 Détection des produits PCR2
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5.6 Confirmation3
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6 Réactifs3
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6.1 Généralités3
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6.2 Milieux de culture3
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6.3 Extraction des acides nucléiques4
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6.4 Réactifs pour la PCR5
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7 Appareillage et matériel5
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7.1 Généralités5
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7.2 Matériel pour la préparation des échantillons avant enrichissement5
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7.3 Matériel pour l'enrichissement microbien6
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7.4 Matériel utilisé pour l'extraction des acides nucléiques6
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7.5 Matériel utilisé pour la PCR6
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7.6 Matériel utilisé pour la détection des produits PCR6
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8 Échantillonnage7
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9 Mode opératoire7
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9.1 Préparation de l'échantillon avant enrichissement7
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9.2 Enrichissement microbien7
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9.3 Préparation des acides nucléiques8
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9.4 Amplification par PCR9
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9.5 Confirmation d'un résultat PCR positif9
- Annexe A (normative) Schéma du mode opératoire11
- Annexe B (informative) Réactions de PCR multiplex pour la détection de gènes codant les types A, B, E et F de la neurotoxine botulique utilisant une électrophorèse en gel d'agarose12
- Annexe C (informative) Essais pour la détection des gènes codant les types A, B, E et F de neurotoxine botulique utilisant la PCR en temps réel30
- Annexe D (informative) Préparation des spores de C. botulinum42
- Bibliographie48
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