NF T90-431
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Qualité de l'eau - Recherche et dénombrement de Legionella spp et de Legionella pneumophila - Méthode par ensemencement direct et après concentration par filtration sur membrane ou centrifugation
Le présent document décrit une méthode pour la recherche et le dénombrement de Legionella spp et de Legionella pneumophila.Il s'applique à tous les types d'eaux propres (eaux destinées à la consommation humaine, eaux chaudes sanitaires, eaux minérales naturelles à usage thermal, eaux récréatives, etc.) et sales (eaux industrielles, eaux naturelles, etc.).Il est susceptible de servir de base de référence dans la réglementation française relative à la qualité des eaux.
Le présent document décrit une méthode pour la recherche et le dénombrement de Legionella spp et de Legionella pneumophila. Il s'applique à tous les types d'eaux propres (eaux destinées à la consommation humaine, eaux chaudes sanitaires, eaux minérales naturelles à usage thermal, eaux récréatives, etc.) et sales (eaux industrielles, eaux naturelles, etc.). Il est susceptible de servir de base de référence dans la réglementation française relative à la qualité des eaux.
Le présent document décrit une méthode générale pour la recherche et le dénombrement des Legionella et Legionella pneumophila. Il a été conçu pour servir de référence dans certaines normes françaises pour l'analyse microbiologique de types d'eaux particuliers (eaux potables, eaux de baignade, eaux de surface, etc.) actuellement en cours d'élaboration à l'AFNOR. En conséquence, son application directe, en dehors de ses usages prévus, implique de vérifier qu'il est adapté au type d'eau analysé et à la précision recherchée, et, d'indiquer quelles options ou modifications sont adoptées dans ce but.
Le présent document spécifie une méthode d'isolement et de dénombrement des Legionella dont Legionella pneumophila dans les eaux. Cette méthode faisant appel à un milieu sélectif peut être appliquée à tous les types d'eaux : eaux destinées à la consommation humaine, eaux chaudes sanitaires, eaux minérales naturelles à usage thermal (définies comme eaux propres) , eaux récréatives, eaux industrielles, eaux d'installation de refroidissement par dispersion d'eau dans un flux d'air (IRDEFA) , eaux naturelles (définies comme eaux sales) .
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1 Domaine d'application5
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2 Références normatives5
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3 Termes et définitions5
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3.1 Définitions générales5
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3.2 Définitions répondant aux besoins de la présente norme5
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4 Principe6
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5 Échantillonnage6
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6 Appareillage et verrerie6
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7 Milieux de culture, diluant, sérums et souches7
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7.1 Prescriptions générales7
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7.2 Diluant7
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7.3 Milieux de culture8
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7.4 Pool de sérums anti-Legionella pneumophila11
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7.5 Souches11
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8 Mode opératoire11
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8.1 Ensemencement11
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8.2 Incubation12
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8.3 Dénombrement des Legionella12
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8.4 Dénombrement des Legionella pneumophila13
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9 Expression des résultats14
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9.1 Considérer d'abord la ou les deux boîtes ensemencées en direct14
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9.2 Si les boîtes ensemencées en direct donnent des nombres inexploitables (n et n' < 5) de colonies confirmées, examiner les boîtes ensemencées après concentration14
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10 Rapport d'essai17
- Annexe A(normative) Boîtes de milieu GVPC à ensemencer en fonction du type d'eau 18
- Annexe B(normative) Tableau récapitulatif des calculs et commentaires pour l'expression des résultats en fonction des volumes analysés, des boîtes retenues pour le calcul final et du nombre de colonies confirmées 19
- Annexe C(informative) Exemples de dénombrements de Legionella et Legionella pneumophila 21
- Annexe D(informative) Variations statistiques et expression des résultats 26
- Bibliographie40
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