Avant-propos4
1 Domaine d'application4
2 Références normatives4
3 Définitions4
3.1 entérovirus4
3.2 entérovirus cultivables5
3.3 entérovirus cultivables selon le présent document5
4 Principe5
4.1 Concentration des virus à partir de l'échantillon d'eau5
4.2 Dénombrement des virus isolés5
4.3 Caractérisation des particules virales isolées5
5 Échantillonnage6
5.1 Prélèvement in situ6
5.2 Prélèvements en récipients stériles6
5.3 Transport des échantillons6
6 Concentration des virus sur la laine de verre6
6.1 Appareillage6
6.2 Réactifs7
6.3 Mode opératoire9
6.4 Conservation des concentrats10
7 Détection, dénombrement et caractérisation des virus11
7.1 Appareillage11
7.2 Réactifs11
7.3 Mode opératoire13
8 Expression des résultats15
8.1 Dénombrement des virus isolés15
8.2 Dénombrement des entérovirus isolés15
9 Données de fidélité15
10 Procès-verbal d'essai15
Annexe A Bibliographie16
Annexe B Schéma de concentration des virus in situ17
Annexe C Procédure pour la détermination de la concentration d'extrait de boeuf à utiliser18
Annexe D Protocole de fabrication d'un filtre en laine de verre19
Annexe E Milieu Essentiel Minimum de Eagle (solution 10 X - tableau E.1) et solution d'acides aminés non essentiels (solution 100 X - tableau E.2)21
Annexe F Solution saline de Puck (solution 1 X - voir tableau F.1)22
Annexe G Préparation de la suspension cellulaire à répartir en microplaques pour le dénombrement par la méthode du NPP23
Annexe H Exemple de calcul du NPP24
Annexe J Performances de la technique de concentration des entérovirus sur laine de verre30