XP CEN ISO/TS 17919
Microbiology of the food chain - Polymerase chain reaction (PCR) for the detection of food-borne pathogens - Detection of botulinum type A, B, E and F neurotoxin- producing clostridia
ISO/TS 17919:2013 specifies a horizontal method for the molecular detection of clostridia carrying botulinum neurotoxin A, B, E, and F genes by a PCR method. This method detects the genes and not the toxins, therefore a positive result does not necessarily mean the presence of these toxins in the sample investigated. ISO/TS 17919:2013 is applicable to products for human consumption, animal feed, and environmental samples. The PCR assays for detection of genetic sequences encoding specific toxin types are described in annexes.
ISO/TS 17919:2013 specifies a horizontal method for the molecular detection of clostridia carrying botulinum neurotoxin A, B, E, and F genes by a PCR method. This method detects the genes and not the toxins, therefore a positive result does not necessarily mean the presence of these toxins in the sample investigated. ISO/TS 17919:2013 is applicable to products for human consumption, animal feed, and environmental samples.
The PCR assays for detection of genetic sequences encoding specific toxin types are described in annexes.
- Avant-proposiv
- Introductionv
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1 Domaine dapplication1
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2 Références normatives1
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3 Termes et définitions1
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4 Symboles et termes abrégés2
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4.1 Symboles2
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4.2 Termes abrégés2
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5 Principes2
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5.1 Généralités2
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5.2 Enrichissement microbien2
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5.3 Extraction des acides nucléiques2
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5.4 Amplification par PCR2
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5.5 Détection des produits PCR2
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5.6 Confirmation3
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6 Réactifs3
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6.1 Généralités3
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6.2 Milieux de culture3
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6.3 Extraction des acides nucléiques4
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6.4 Réactifs pour la PCR5
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7 Appareillage et matériel5
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7.1 Généralités5
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7.2 Matériel pour la préparation des échantillons avant enrichissement5
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7.3 Matériel pour l'enrichissement microbien6
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7.4 Matériel utilisé pour l'extraction des acides nucléiques6
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7.5 Matériel utilisé pour la PCR6
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7.6 Matériel utilisé pour la détection des produits PCR6
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8 Échantillonnage7
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9 Mode opératoire7
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9.1 Préparation de l'échantillon avant enrichissement7
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9.2 Enrichissement microbien7
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9.3 Préparation des acides nucléiques8
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9.4 Amplification par PCR9
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9.5 Confirmation d'un résultat PCR positif9
- Annexe A (normative) Schéma du mode opératoire11
- Annexe B (informative) Réactions de PCR multiplex pour la détection de gènes codant les types A, B, E et F de la neurotoxine botulique utilisant une électrophorèse en gel d'agarose12
- Annexe C (informative) Essais pour la détection des gènes codant les types A, B, E et F de neurotoxine botulique utilisant la PCR en temps réel30
- Annexe D (informative) Préparation des spores de C. botulinum42
- Bibliographie48
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