XP T90-451
Essais des eaux - Recherche des entérovirus - Méthode par concentration sur laine de verre et détection par culture cellulaire
Le présent document s'adresse aux laboratoires ayant à rechercher et dénombrer les entérovirus dans les types d'eaux. La méthode décrite comprend deux étapes successives : la concentration des virus et la détection, le dénombrement et la caractérisation des virus.
Le présent document s'adresse aux laboratoires ayant à rechercher et dénombrer les entérovirus dans les types d'eaux. La méthode décrite comprend deux étapes successives : la concentration des virus et la détection, le dénombrement et la caractérisation des virus.
Le présent document s'adresse aux laboratoires ayant à rechercher et dénombre les entérovirus dans les types d'eaux. La méthode décrite comprend deux étapes successives : la concentration des virus et la détection, dénombrement et caractérisation des virus.
- Avant-propos4
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1 Domaine d'application4
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2 Références normatives4
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3 Définitions4
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3.1 entérovirus4
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3.2 entérovirus cultivables5
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3.3 entérovirus cultivables selon le présent document5
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4 Principe5
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4.1 Concentration des virus à partir de l'échantillon d'eau5
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4.2 Dénombrement des virus isolés5
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4.3 Caractérisation des particules virales isolées5
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5 Échantillonnage6
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5.1 Prélèvement in situ6
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5.2 Prélèvements en récipients stériles6
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5.3 Transport des échantillons6
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6 Concentration des virus sur la laine de verre6
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6.1 Appareillage6
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6.2 Réactifs7
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6.3 Mode opératoire9
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6.4 Conservation des concentrats10
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7 Détection, dénombrement et caractérisation des virus11
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7.1 Appareillage11
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7.2 Réactifs11
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7.3 Mode opératoire13
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8 Expression des résultats15
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8.1 Dénombrement des virus isolés15
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8.2 Dénombrement des entérovirus isolés15
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9 Données de fidélité15
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10 Procès-verbal d'essai15
- Annexe A Bibliographie16
- Annexe B Schéma de concentration des virus in situ17
- Annexe C Procédure pour la détermination de la concentration d'extrait de boeuf à utiliser18
- Annexe D Protocole de fabrication d'un filtre en laine de verre19
- Annexe E Milieu Essentiel Minimum de Eagle (solution 10 X - tableau E.1) et solution d'acides aminés non essentiels (solution 100 X - tableau E.2)21
- Annexe F Solution saline de Puck (solution 1 X - voir tableau F.1)22
- Annexe G Préparation de la suspension cellulaire à répartir en microplaques pour le dénombrement par la méthode du NPP23
- Annexe H Exemple de calcul du NPP24
- Annexe J Performances de la technique de concentration des entérovirus sur laine de verre30
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