XP CEN ISO/TS 13136

XP CEN ISO/TS 13136

décembre 2012
Norme En vigueur

Microbiologie des aliments - Méthode basée sur la réaction de polymérisation en chaîne (PCR) en temps réel pour la détection des micro-organismes pathogènes dans les aliments - Méthode horizontale pour la détection des Escherichia coli producteurs de Shigatoxines (STEC) et la détermination des sérogroupes O157, O111, O26, O103 et O145

L'ISO/TS 13136:2012 décrit une méthode horizontale pour la détection: a)des principaux gènes de virulence des STEC; b) des gènes associés aux sérogroupes O157, O111, O26, O103 et O145. Dans le cas de la détection de ces gènes, une procédure d'isolement de souches est mise en place afin de confirmer la présence simultanée des gènes dans une seule et même cellule bactérienne vivante. L'ISO/TS 13136:2012 repose sur l'utilisation de la PCR en temps réel comme technologie de référence pour la détection des gènes de virulence et des gènes associés aux sérogroupes. Un protocole de PCR en temps réel est par conséquent décrit en détail. L'ISO/TS 13136:2012 s'applique: 1) aux produits destinés à être consommés par l'Homme et aux aliments pour animaux; 2) aux échantillons environnementaux dans la zone de production et de manipulation des aliments; 3) aux échantillons environnementaux dans la zone de production primaire.

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Informations générales

Collections

Normes nationales et documents normatifs nationaux

Date de publication

décembre 2012

Nombre de pages

35 p.

Référence

XP CEN ISO/TS 13136

Codes ICS

07.100.30   Microbiologie alimentaire

Indice de classement

V08-790

Numéro de tirage

1 - 26/12/2012

Parenté internationale

ISO/TS 13136:2012

Parenté européenne

CEN ISO/TS 13136:2012
Résumé
Microbiologie des aliments - Méthode basée sur la réaction de polymérisation en chaîne (PCR) en temps réel pour la détection des micro-organismes pathogènes dans les aliments - Méthode horizontale pour la détection des Escherichia coli producteurs de Shigatoxines (STEC) et la détermination des sérogroupes O157, O111, O26, O103 et O145

L'ISO/TS 13136:2012 décrit une méthode horizontale pour la détection: a)des principaux gènes de virulence des STEC; b) des gènes associés aux sérogroupes O157, O111, O26, O103 et O145.

Dans le cas de la détection de ces gènes, une procédure d'isolement de souches est mise en place afin de confirmer la présence simultanée des gènes dans une seule et même cellule bactérienne vivante.

L'ISO/TS 13136:2012 repose sur l'utilisation de la PCR en temps réel comme technologie de référence pour la détection des gènes de virulence et des gènes associés aux sérogroupes. Un protocole de PCR en temps réel est par conséquent décrit en détail.

L'ISO/TS 13136:2012 s'applique: 1) aux produits destinés à être consommés par l'Homme et aux aliments pour animaux; 2) aux échantillons environnementaux dans la zone de production et de manipulation des aliments; 3) aux échantillons environnementaux dans la zone de production primaire.

Sommaire
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  • Avant-propos
    iv
  • Introduction
    v
  • 1 Domaine d'application
    1
  • 2 Références normatives
    2
  • 3 Termes et définitions
    2
  • 4 Principe
    2
  • 4.1 Généralités
    2
  • 4.2 Enrichissement microbien
    3
  • 4.3 Extraction des acides nucléiques
    3
  • 4.4 Gènes cibles
    3
  • 4.5 Détection
    3
  • 4.6 Isolement
    4
  • 5 Diluants, milieux de culture et réactifs
    4
  • 5.1 Milieux de culture
    4
  • 5.2 Réactifs pour l'extraction des acides nucléiques
    5
  • 5.3 Réactifs pour la PCR
    5
  • 6 Appareillage
    6
  • 7 Échantillonnage
    6
  • 8 Préparation de l'échantillon pour essai
    6
  • 9 Mode opératoire
    6
  • 9.1 Prise d'essai et suspension mère
    6
  • 9.2 Enrichissement
    7
  • 9.3 Extraction des acides nucléiques
    7
  • 9.4 Amplification par PCR (pour la PCR en temps réel)
    7
  • 9.5 Isolement de souches
    8
  • 10 Expression des résultats
    8
  • 11 Données de performances
    9
  • Annexe A (normative) Schéma du mode opératoire de criblage
    13
  • Annexe B (normative) Schéma du mode opératoire d'isolement et de confirmation
    14
  • Annexe C (informative) Identification des Escherichia coli producteurs de Shigatoxines (STEC) par amplification PCR multiplex des gènes de virulence et détection des amplicons par électrophorèse en gel d'agarose
    15
  • Annexe D (informative) Contrôle interne d'amplification
    20
  • Annexe E (informative) Amorces et sondes pour les réactions PCR
    21
  • Annexe F (normative) Isolement des souches STEC
    23
  • Bibliographie
    24
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