NF U47-017
Méthodes d'analyse en santé animale - Recherche d'anticorps contre la rhinopneumonie équine par la technique de fixation du complément
Le présent document décrit une technique destinée à la recherche quantitative dans le sérum, des anticorps dirigés contre la rhinopneumonie chez les équidés par la méthode de fixation du complément. Cette technique détecte à la fois des anticorps dirigés contre les herpesvirus équins de type 1 et de type 4. Elle ne permet pas de faire de distinction entre les anticorps naturels et des anticorps vaccinaux.
Le présent document décrit une technique destinée à la recherche quantitative dans le sérum, des anticorps dirigés contre la rhinopneumonie chez les équidés par la méthode de fixation du complément. Cette technique détecte à la fois des anticorps dirigés contre les herpesvirus équins de type 1 et de type 4. Elle ne permet pas de faire de distinction entre les anticorps naturels et des anticorps vaccinaux.
Le présent document s'inscrit dans un ensemble de normes de méthodes d'analyse en santé animale. Il décrit une technique de mise en évidence d'anticorps dirigés contre le virus de la rhinopneumonie dans le sérum des équidés. La technique utilisée est la fixation du complément.
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1 Domaine d'application6
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2 Références6
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2.1 Références normatives6
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2.2 Références réglementaires6
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3 Termes, définitions et abréviations6
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4 Principe et réaction7
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4.1 Principe7
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4.2 Réaction7
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4.3 Contrôles8
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5 Diluants, milieux de culture, réactifs et autres produits9
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5.1 Diluants9
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5.2 Milieux de culture9
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5.3 Réactifs10
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5.4 Autres produits10
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6 Appareillage et verrerie11
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7 Échantillonnage11
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8 Préparation de l'échantillon pour analyse11
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9 Mode opératoire11
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9.1 Épreuve11
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9.2 Validation et lecture13
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9.3 Interprétation13
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10 Conditions de conservation et d'élimination des échantillons14
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11 Restitution des résultats14
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12 Fidélité14
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13 Rapport14
- Annexe A (normative) Titrage du sérum hémolytique15
- Annexe B (normative) Constitution d'un stock de complément16
- Annexe C (normative) Préparation de la gamme d'hémolyse17
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C.1 Préparation de la gamme d'hémolyse17
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C.2 Interprétation des résultats17
- Annexe D (normative) Titrage du complément18
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D.1 Préparation du complément et de l'antigène, répartition18
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D.2 Préparation du système hémolytique, répartition19
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D.3 Lecture et calcul du titre19
- Annexe E (normative) Titrage de l'antigène20
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E.1 Préparation du sérum positif20
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E.2 Préparation des antigènes20
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E.3 Répartition des antigènes et du sérum20
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E.4 Préparation et répartition du complément20
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E.5 Réalisation des témoins21
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E.6 Révélation (le lendemain) (9.1.10)21
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E.7 Validation et lecture21
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E.8 Détermination de la dilution d'antigène à utiliser21
- Bibliographie22
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